विषय

• मुख्य अंतर
• सदर्न ब्लॉटिंग बनाम पश्चिमी सोख्ता
• तुलना चार्ट
• दक्षिणी सोख्ता क्या है?
• वेस्टर्न ब्लॉटिंग क्या है?
• मुख्य अंतर
• निष्कर्ष

मुख्य अंतर

सदर्न ब्लॉटिंग और वेस्टर्न ब्लॉटिंग के बीच मुख्य अंतर यह है कि सदर्न ब्लॉटिंग एक तकनीक है जिसका उपयोग किसी दिए गए नमूने में एक विशिष्ट डीएनए के टुकड़े का पता लगाने के लिए किया जाता है जबकि वेस्टर्न ब्लॉटिंग का उपयोग किसी दिए गए नमूने में एक विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने के लिए किया जाता है।

सदर्न ब्लॉटिंग बनाम पश्चिमी सोख्ता

ब्लॉटिंग एक ऐसी तकनीक है जिसका इस्तेमाल वैज्ञानिकों द्वारा विभिन्न प्रकार के अणुओं को मिश्रण या नमूने से अलग करने के लिए किया जाता है। इस तकनीक में, एक मिश्रण में न्यूक्लिक एसिड (डीएनए और आरएनए) और प्रोटीन जैसे मैक्रोमोलेक्यूल जेल के स्लैब के माध्यम से चलते हैं। यहां, मिनट के कण बड़े लोगों की तुलना में तेजी से आगे बढ़ेंगे। इन अणुओं को एक स्थिर झिल्ली की सतह के खिलाफ दबाया जाता है जो झिल्ली पर अणुओं को स्थानांतरित करता है। विशिष्ट सामग्री का पता लगाने के आधार पर विभिन्न प्रकार के धब्बा होते हैं, अर्थात्, दक्षिणी सोख्ता, उत्तरी सोख्ता, और पश्चिमी धब्बा। दक्षिणी सोख्ता ब्लोटिंग का प्रकार है जो डीएनए का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है जबकि पश्चिमी सोख्ता का उपयोग प्रोटीन का पता लगाने के लिए किया जाता है। दक्षिणी सोख्ता 1975 में एडवर्ड एम। दक्षिणी द्वारा विकसित किया गया था। इसलिए, इसे दक्षिणी सोख्ता के रूप में जाना जाता है। दूसरी ओर, 1979 में स्टैनफोर्ड विश्वविद्यालय में जॉर्ज स्टार्क के समूह द्वारा पश्चिमी सोख्ता विकसित किया गया था। इस नाम का उपयोग दक्षिणी सोख्ता के साथ मेल खाने के लिए किया गया था। दक्षिणी सोख्ता एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, जबकि पश्चिमी धब्बा का उपयोग एक विशिष्ट अमीनो एसिड या प्रोटीन अनुक्रम का पता लगाने के लिए किया जाता है।

तुलना चार्ट

सदर्न ब्लॉटिंग	पश्चिमी सोख्ता
एक तकनीक जो किसी दिए गए मिश्रण में एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग की जाती है, उसे दक्षिणी सोख्ता के रूप में जाना जाता है।	एक तकनीक जिसे किसी दिए गए मिश्रण में प्रोटीन के एक विशिष्ट अमीनो एसिड अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, दक्षिणी सोख्ता के रूप में जाना जाता है।
द्वारा विकसित
दक्षिणी सोख्ता 1975 में एडवर्ड एम। दक्षिणी द्वारा विकसित किया गया था।	वेस्टर्न ब्लॉटिंग को 1979 में स्टैनफोर्ड यूनिवर्सिटी में जॉर्ज स्टार्क के समूह द्वारा विकसित किया गया था।
जांच का प्रकार
एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए दक्षिणी सोख्ता का उपयोग किया जाता है।	पश्चिमी सोख्ता का उपयोग एक विशिष्ट अमीनो एसिड या प्रोटीन अनुक्रम का पता लगाने के लिए किया जाता है।
सिद्धांत
यह संकरण के सिद्धांत पर काम करता है।	यह इम्यूनोडेटेक्शन विधि या एंटीजन-एंटीबॉडी इंटरैक्शन के सिद्धांत पर काम करता है।
जांच
एक फंसे डीएनए या कभी-कभी आरएनए का उपयोग जांच के रूप में किया जाता है।	प्राथमिक और द्वितीयक एंटीबॉडी का उपयोग जांच के रूप में किया जाता है।
जेल वैद्युतकणसंचलन
Agarose gel वैद्युतकणसंचलन का उपयोग दक्षिणी सोख्ता में किया जाता है।	एसडीएस पृष्ठ / पॉलीएक्रिलामाइड जेल का उपयोग पश्चिमी सोख्ता में प्रोटीन को अलग करने के लिए किया जाता है
धब्बा बनाने की प्रक्रिया
दक्षिणी सोख्ता केशिका हस्तांतरण प्रक्रिया का अनुसरण करता है।	वेस्टर्न ब्लॉटिंग इलेक्ट्रिक ट्रांसफर प्रक्रिया का अनुसरण करता है।
नमूना
दक्षिणी सोख्ता के दौरान, नमूने को असंतृप्त करने की आवश्यकता होती है।	पश्चिमी सोख्ता के दौरान, नमूना अपनी मूल स्थिति में होना चाहिए।
ब्लॉक कर रहा है
दक्षिणी ब्लाटिंग में ब्लॉकिंग जैसा कोई कदम शामिल नहीं है।	पश्चिमी सोख्ता के दौरान, दूध पाउडर या गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन (बीएसए) की मदद से गैर-प्रतिपिंड एंटीबॉडी साइटों को नाइट्रोसेल्यूलोज पेपर पर अवरुद्ध कर दिया जाता है।
लेबल करने के तरीके
दक्षिणी सोख्ता में इस्तेमाल होने वाले सामान्य लेबलिंग तरीके क्रोमोजेनिक रंजक या रेडिओलाबेलिंग या फ्लोरोसेंट लेबलिंग आदि के उपयोग हैं।	पश्चिमी सोख्ता में प्रयोग किए जाने वाले लेबलिंग तरीकों में फ्लोरोसेंटली लेबल वाले एंटीबॉडी या रेडियोलोबेलिंग, क्रोमोजेनिक डाई या डायमोबेनज़िडीन के निर्माण आदि का उपयोग होता है।
जांच के तरीके
दक्षिणी सोख्ता में पता लगाने के तरीकों के रूप में प्रकाश, ऑटोरैडियोग्राफ़ और रंग में परिवर्तन का पता लगाया जाता है।	वेस्टर्न ब्लॉटिंग में डिटेक्शन मेथड्स रंग में परिवर्तन और प्रकाश का पता लगाने आदि हैं।
आवेदन
दक्षिणी सोख्ता का उपयोग डीएनए का पता लगाने, पितृत्व परीक्षण, डीएनए छूत, पीड़ित की पहचान के लिए, अपराधियों की पहचान के लिए, संक्रामक एजेंटों को खोजने और उत्परिवर्तन या जीन पुनर्व्यवस्था, आदि की पहचान करने के लिए किया जाता है।	पश्चिमी सोख्ता का उपयोग सीरम में एचआईवी, वायरस, और बैक्टीरिया आदि की उपस्थिति का पता लगाने के लिए, प्रोटीन की संख्या का पता लगाने के लिए किया जाता है, दोषपूर्ण प्रोटीन का पता लगाने के लिए और दाद, हेपेटाइटिस बी, लाइम के लिए एक निश्चित उपाय के रूप में उपयोग किया जाता है। रोग, और Creutzfeldt-याकूब रोग, आदि।

दक्षिणी सोख्ता क्या है?

दक्षिणी सोख्ता सबसे पुराना धब्बा विधि है जिसे एडविन दक्षिणी द्वारा दिया गया था, जिसे दक्षिणी सोख्ता के रूप में नामित किया गया था। इसका उपयोग किसी दिए गए नमूने या मिश्रण में डीएनए के एक विशिष्ट अनुक्रम का पता लगाने के लिए किया जाता है। दक्षिणी सोख्ता के दौरान शामिल कदम वैद्युतकणसंचलन, स्थानांतरण, और विशिष्ट दृश्यों का पता लगाने हैं। सबसे पहले, डीएनए को विशिष्ट प्रतिबंध एंजाइम की मदद से खंडित किया जाता है। फिर वांछित डीएनए टुकड़े जेल वैद्युतकणसंचलन के माध्यम से अलग किए जाते हैं। इन टुकड़ों को एक क्षारीय घोल, जैसे, NaOH, आदि की मदद से दो अलग-अलग गंधों को अलग करने के लिए दिया जाता है। इन एकल-फंसे डीएनए टुकड़ों को फिर धब्बा बनाने की प्रक्रिया के माध्यम से एक झिल्ली पर स्थानांतरित किया जाता है। इस झिल्ली-बाउंड डीएनए को तब एक लेबल जांच के साथ इलाज किया जाता है। यह जांच झिल्ली डीएनए पर उसके पूरक स्ट्रैंड से जुड़ी होगी जिसे ऑटोरैडियोग्राम आदि द्वारा देखा जा सकता है।

वेस्टर्न ब्लॉटिंग क्या है?

पश्चिमी सोख्ता विधि का आविष्कार जॉर्ज स्टार्क के स्टैनफोर्ड विश्वविद्यालय में समूह द्वारा किया गया था जो प्रोटीन में अमीनो एसिड के एक विशिष्ट अनुक्रम की पहचान करने के लिए उपयोग किया जाता है। इसे प्रोटीन ब्लॉट या इम्यून-ब्लॉटिंग के रूप में भी जाना जाता है। पश्चिमी सोख्ता के दौरान चरण वैद्युतकणसंचलन, स्थानांतरण, और विशिष्ट प्रोटीन का पता लगाने हैं। सबसे पहले, मिश्रण को समरूप बनाना। फिर इलेक्ट्रोफोरोसिस की मदद से ब्याज के अणु को अलग करें। झिल्ली पर इन अणुओं को स्थानांतरित करें और विशिष्ट जांच का उपयोग करके विशिष्ट प्रोटीन की पहचान करें।

मुख्य अंतर

1. एक तकनीक जिसे किसी दिए गए मिश्रण में एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, जिसे दक्षिणी ब्लॉटिंग के रूप में जाना जाता है, जबकि एक मिश्रण में प्रोटीन के एक विशिष्ट अमीनो एसिड अनुक्रम का पता लगाने के लिए उपयोग की जाने वाली तकनीक को दक्षिणी सोख्ता के रूप में जाना जाता है।
2. दक्षिणी सोख्ता 1975 में एडवर्ड एम। दक्षिणी द्वारा विकसित किया गया था, इसलिए दक्षिणी सोख्ता के रूप में जाना जाता है। दूसरी ओर, 1979 में जॉर्ज स्टार्क के स्टैनफोर्ड विश्वविद्यालय के समूह द्वारा पश्चिमी सोख्ता विकसित किया गया था।
3. एक विशिष्ट डीएनए अनुक्रम का पता लगाने के लिए दक्षिणी सोख्ता का उपयोग किया जाता है। इसके विपरीत, पश्चिमी सोख्ता का उपयोग एक विशिष्ट अमीनो एसिड या प्रोटीन अनुक्रम का पता लगाने के लिए किया जाता है।
4. दक्षिणी सोख्ता फ्लिप पक्ष पर संकरण के सिद्धांत पर काम करता है; पश्चिमी सोख्ता इम्युनोडेटेक्शन विधि या एंटीजन-एंटीबॉडी बातचीत के सिद्धांत पर काम करता है।
5. एक एकल-फंसे हुए डीएनए या कभी-कभी आरएनए का उपयोग दूसरी तरफ दक्षिणी सोख्ता में एक जांच के रूप में किया जाता है, पश्चिमी सोख्ता में प्राथमिक और माध्यमिक एंटीबॉडी का उपयोग जांच के रूप में किया जाता है।
6. Agarose gel वैद्युतकणसंचलन का उपयोग दक्षिणी सोख्ता में किया जाता है जबकि SDS PAGE / Polyacrylamide gel का उपयोग पश्चिमी सोख्ता में प्रोटीन को अलग करने के लिए किया जाता है।
7. दक्षिणी सोख्ता केशिका हस्तांतरण प्रक्रिया का अनुसरण करता है, दूसरी ओर; वेस्टर्न ब्लॉटिंग इलेक्ट्रिक ट्रांसफर प्रक्रिया का अनुसरण करता है।
8. दक्षिणी सोख्ता के दौरान, नमूने को असंतृप्त करने की आवश्यकता होती है, जबकि पश्चिमी सोख्ता के दौरान, नमूना अपनी मूल स्थिति में होना चाहिए।
9. ब्लॉकिंग की तरह कोई भी कदम दक्षिणी किनारे पर धब्बा लगाने में शामिल नहीं है, पश्चिमी सोख्ता के दौरान, निरर्थक एंटीबॉडी साइटों को दूध पाउडर या गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन (बीएसए) की मदद से नाइट्रोसेल्यूलोज पेपर पर अवरुद्ध किया जाता है।
10. दक्षिणी सोख्ता में इस्तेमाल होने वाले सामान्य लेबलिंग तरीकों में क्रोमोजेनिक रंजक या रेडिओलाबेलिंग या फ्लोरोसेंट लेबलिंग आदि का उपयोग होता है, जबकि पश्चिमी सोख्ता में इस्तेमाल होने वाले लेबलिंग तरीकों में फ्लोरोसेंटली लेबलिंग एंटीबॉडी या रेडिओलाबेलिंग, क्रोमोजेनिक रंजक या डायमिनोबेंजिडाइन के गठन आदि का उपयोग किया जाता है।
11. प्रकाश का पता लगाने, ऑटोरैडियोग्राफ़, और रंग में परिवर्तन का उपयोग दक्षिणी सोख्ता में पता लगाने के तरीकों के रूप में किया जाता है, जबकि, पश्चिमी सोख्ता में पता लगाने के तरीके रंग में परिवर्तन और प्रकाश का पता लगाने, आदि हैं।
12. दक्षिणी ब्लॉटिंग का उपयोग डीएनए का पता लगाने, पितृत्व परीक्षण, डीएनए फिंगरप्रिंटिंग, पीड़ित की पहचान के लिए, अपराधियों की पहचान के लिए, संक्रामक एजेंटों को खोजने और उत्परिवर्तन या जीन पुनर्व्यवस्था आदि की पहचान करने के लिए किया जाता है। इसके विपरीत, वेस्टर्न ब्लॉटिंग का उपयोग प्रोटीन की संख्या को खोजने के लिए किया जाता है। मिश्रण, सीरम में एचआईवी, वायरस और बैक्टीरिया आदि की उपस्थिति का पता लगाने के लिए, दोषपूर्ण प्रोटीन का पता लगाने के लिए और दाद, हेपेटाइटिस बी, लाइम रोग, और क्रुट्ज़फेल्ट-जैकब रोग, आदि के लिए एक निश्चित उपाय के रूप में उपयोग किया जाता है।

निष्कर्ष

उपरोक्त चर्चा का सारांश है कि दक्षिणी ब्लॉटिंग एक नमूने में विशिष्ट डीएनए सेगमेंट का पता लगाने के लिए उपयोग की जाने वाली सबसे पुरानी ब्लॉटिंग तकनीक है, जबकि वेस्टर्न ब्लॉटिंग की खोज बाद में की गई और इसका उपयोग अमीनो एसिड या एक विशिष्ट प्रोटीन के विशिष्ट अनुक्रम की पहचान करने के लिए किया गया।